QF-PCR là viết tắt PCR huỳnh quang định lượng (quantitative fluorescence PCR). Đây là một kỹ thuật PCR dùng để khuếch đại các đoạn DNA ngắn lặp lại đặc hiệu (STR), đánh dấu bằng tín hiệu huỳnh quang và định lượng bằng điện di mao quản.
QF-PCR được dùng để kiểm tra liều gen, ví dụ: số lượng bản sao của gen trong 1 mẫu khảo sát, số lượng của các đoạn nhiễm sắc thể. Các nhiễm sắc thể thường được khảo sát bằng QF-PCR là nhiễm sắc thể (NST) 13, 18, 21, X, Y.
Mỗi NST sẽ được khảo sát tại nhiều đoạn STR khác nhau. Do các locus STR thường được chọn có đặc tính đa hình cao nên ít khi xảy ra trường hợp trisomy cho kết quả dạng đồng hợp tử không thể kết luận được. Prenatal Lab sử dụng QF-PCR khảo sát 32 đoạn STR khác nhau trên các NST 13, 18, 21, X và Y. Nếu có bất thường trên NST nào chúng tôi sẽ chẩn đoán xác định lại bằng một phản ứng QF-PCR riêng biệt đặc hiệu cho riêng loại NST thể đó với 7-9 đoạn STR.
Hiện nay QF-PCR thường được chỉ định trong chẩn đoán nhanh trước sinh rối loạn nhiễm sắc thể cho các trường hợp thai nguy cơ cao bị Hội chứng Down, Hội chứng Edwards, Hội chứng Turner, Hội chứng Klinefelter…
Loại mẫu có thể sử dụng cho kỹ thuật này gồm: máu, dịch ối, gai nhau, dây rốn, máu dây rốn, mô thai sảy…
QF PCR – Quy trình kỹ thuật và thời gian thực hiện
Phương pháp này cho kết quả nhanh, có độ nhạy và độ đặc hiệu cao, với ưu điểm nổi bật là năng suất cao và giá thành thấp.
QF PCR – Hạn chế
QF-PCR là kỹ thuật chẩn đoán nhanh, đáng tin cậy trong chẩn đoán rối loạn số lượng nhiễm sắc thể nhưng vẫn tồn tại những hạn chế:
- Trong chẩn đoán thể khảm nhiễm sắc thể.
- Trong chẩn đoán bất thường cấu trúc nhiễm sắc thể.